Врождённые Лимфоидные Клетки (Innate Lymphoid Cells). Лимфоцитарный росток Функции клеток лимфоидного ряда

Общее у всех лимфоидных клеток: базофилия цитоплазмы различной степени, облаковидный характер хроматина, зернистость имеет вид гранул.

Предшественники лимфоцитов образуются в костном мозге, затем в ходе дифференцировки и созревания они заселяют центральные органы иммунной системы, где происходит созревание B-лимфоцитов (гуморальный иммунитет), и T-лимфоцитов (клеточный иммунитет). После чего В-лимфоциты и Т-лимфоциты заселяют селезенку и лимфатические узлы, где размещаются в хорошо дифференцируемых В-зависимых и Т-зависимых зонах.

Пролимфоцит - клетка круглой формы, с достаточно трудной дифференциацией и морфологической характеристикой. Содержит ядро с нежной структурой с остатками ядрышек. Цитоплазма базофильная, без гранул.

Лимфоцит - имеет разнообразную морфологическую характеристику, поскольку популяции лимфоцитов, находящихся в периферической крови достаточно разнообразны. Имеет ряд четких признаков: цитоплазма клетки светло-базофильная, ядро круглое или овальное, эксцентрично расположенное, характер хроматина облаковидный, окраска ядра интенсивная. При окраске по Романовскому ядрышки в лимфоцитах не определяются, но различимы 1-3 ядрышка при специальной окраске метиленовым синим.

В зависимости от ядрерно-цитоплазматического соотношения различают лимфоциты:

• узкоцитоплазменные, среднецитоплазменные - малые лимфоциты (6-9 мкм), ядро круглое (овальное), темное с плотным хроматином, занимает большую часть клетки, цитоплазма в виде узкого ободка вокруг ядра или в виде серпа;
• широкоцитоплазменные - большие лимфоциты (9-15 мкм), цитоплазма занимает значительную часть клетки, светло-голубая, с азурными гранулами, хроматин ядра грубый не такой плотный, как у остальных лимфоцитов.

В периферической крови в норме не встречается, находится в костном мозге. Цитоплазма резко базофильная, ядро эксцентрично расположено, наличие вакуолей в цитоплазме.

Причины лимфоцитоза (повышенного содержания лимфоцитов):

• острые инфекции: коклюш, инфекционный мононуклеоз, инфекционный гепатит;
• хронические инфекции: бруцеллез, туберкулез, сифилис;
• лимфоцитарный лейкоз, волосатоклеточный лейкоз, лимфосаркома.

Причины лимфопении (сниженного содержания лимфоцитов):

• большинство острых инфекций;
• сердечная недостаточность;
• острый туберкулез;
• карциномы, лимфомы, коллагенозы, агранулоцитоз, иммуннодефицитные состояния;
• следствие некоторых терапевтических процедур: введение кортикостероидов, рентгеновское облучение, некоторые химиотерапевтические средства.

При некоторых заболеваниях популяция лимфоцитов приобретает морфологическое разнообразие.

ВНИМАНИЕ! Информация, представленная сайте сайт носит справочный характер. Администрация сайта не несет ответственности за возможные негативные последствия в случае приема каких-либо лекарств или процедур без назначения врача!

Лимфоциты - ключевые клетки адаптивного иммунитета. Они несут антигенраспознающие рецепторы и выполняют основные эффекторные и регуляторные функции. Лишь естественные киллеры, или NK-клетки, не способны распознавать индивидуальные антигены и относятся к клеткам врожденного иммунитета, занимая в нем обособленное место. К клеткам врожденного иммунитета или к «промежуточной зоне» между врожденным

и адаптивным иммунитетом относят также у8Т-, NKT-, В1- клетки, а также В-лимфоциты маргинальной зоны селезенки. Тем не менее, учитывая общность происхождения этих лимфоцитов и «классических» Т- и В-клеток, рассмотрим их в разделе, посвященном адаптивному иммунитету.
В главе 1 были приведены основные характеристики лимфоцитов и в общих чертах охарактеризована их роль в иммунитете. Лимфоциты - клетки малого размера (6-8 мкм), имеющие округлую форму с большим бобовидным ядром, занимающим почти всю клетку, и слабо выраженной цитоплазмой, бедной гранулами. Однако морфология не может служить специфичным и надежным признаком для идентификации лимфоцитов, поскольку сходной морфологией обладают и другие клетки в период функционального покоя (например, кроветворные стволовые клетки). Специфическим признаком Т- и В-лимфоцитов является наличие на их поверхности антигенраспознающих рецепторов. Популяции Т- и В-кле- ток имеют клональную структуру: в процессе дифференцировки каждая клетка приобретает рецептор уникальной специфичности. При встрече с антигеном и активации лимфоциты пролиферируют, образуя клон, каждая клетка которого несет рецептор точно такой же специфичности, что и «материнская» клетка. Клетки разных клонов отличаются по структуре и специфичности антигенраспознающих рецепторов. Напомним, что Т-лим- фоциты дифференцируются в тимусе, а В-лимфоциты развиваются у птиц в бурсе (сумке) Фабриция, а у млекопитающих - в костном мозгу.
Наиболее общие свойства и маркеры клеток, принадлежащих к основным популяциям лимфоцитов, а также внутриклеточные факторы, определяющие их дифференцировку (дифференцировочные факторы), представлены в табл. 3.10 и на рис. 3.35. На рис. 3.36 показана сравнительная характеристика мембранного фенотипа зрелых Т- и В-лимфоцитов.
Таблица 3.10. Характеристика основных популяций лимфоцитов человека

Признак	В-лимфоциты	Т-лимфоциты	NK-клетки
Органы, в которых развиваются клетки	Костный мозг	Тимус	Костный мозг
Рецептор для антигена	В-клеточный рецептор	Т-клеточный рецептор (ар или у8)	Нет
Распознаваемые молекулы	Свободный антиген	Пептиды или липиды в составе молекул гистосовместимости	Стрессорные молекулы, молекулы главного комплекса гистосовместимости
Основные мембранные маркеры	CD19, мембранный иммуноглобулин (менее специфичны CD20, CD21, CD72)	Комплекс CD3- TCR (менее специфичны CD2, CD7)	CD56 (менее специфичны NKG2, KIR и др.)
Маркеры субпопуляций	CD5, CD43	CD4, CD8	CD16
Содержание в крови, %	10-18	65-75	10-20
Рециркуляция	Слабая	Сильная	Отсутствует

Рис. 3.35. Ранние этапы дифференцировки Т- и В-лимфоцитов с указанием дифферен- цировочных факторов и мембранных маркеров. Эллипсы означают клетки (указаны их мембранные маркеры), в прямоугольниках указаны дифференцировочные факторы

Рис. 3.36. Мембранные маркеры Т- и В-клеток. Мембранные молекулы отмечены линиями, пересекающими круг. Цветом выделены разные функциональные группы молекул

2180 0

Нарушение регуляции иммунной системы может приводить к внезапному появлению новообразований, особенно лимфоидных клеток. Это происходит у пациентов с первичными иммунодефицитными заболеваниями, СПИДом и иммуносупрессией после трансплантации органов. При этих состояниях особенно часто развиваются агрессивные В-клеточные лимфомы, часто ассоциированные с вирусом Эпштейна-Барр. В этом подразделе сначала изложены общие черты лимфоидных опухолей, а затем рассказано о специфических свойствах их наиболее важных типов.

Лимфоидный лейкоз и лимфома были изначально отнесены к разным нозологиям на основании клеточной морфологии и клинических данных. Определение «лейкоз» подразумевает, что опухолевые клетки встречаются преимущественно в периферической крови и/или в костном мозге. Лимфома представляет собой твердые массы в лимфатических узлах, селезенке , тимусе или нелимфоидных органах. Иногда одни и те же типы опухолевых клеток могут встречаться во всех указанных местах (лейкоз/лимфома).

В 1996 г. Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) рекомендовала использовать классификацию опухолей, основанную на морфологии исходной клетки: В-клетки в противопоставление T/NK (Т-клетки/натуральные киллеры), и степени дифференцировки: незрелые (клетки-предшественники) в противоположность зрелым (периферическим) (табл. 17.4). Считается, что опухоли вырастают из трансформированных лимфоидных клеток, которые останавливаются в своем развитии. Они имеют такие же поверхностные маркеры и многие другие свойства, как и соответствующие нормальные клетки на этой стадии развития.

Опухолевые клетки, однако, могут не продолжать созревание и накапливаться в большом количестве; все они происходят от единого клона (т.е. они моноклональны). Они также будут занимать одни и те же участки и мигрировать теми же путям развития, что и их нормальные двойники, а именно костный мозг для незрелых В-клеток, тимус для незрелых Т-лимфоцитов и т.д.

Анализ ДНК, извлеченной из В- и Т-клеточных опухолей (Саузерн блот), выявляет одинаковый участок связывания и в гене иммуноглобулинов, и гене Т-клеточного рецептора соответственно. Такие данные свидетельствуют, что все опухолевые клетки имеют одинаковую реаранжировку этих генов, что и позволяет судить о моноклональности такого лимфоидного роста. Для определения малой популяции моноклональных клеток перед проведением анализа по методу Саузерн блот может быть использована ПЦР.

Для некоторых лимфоидных новообразований были определены уникальные молекулярные аномалии, которые могут способствовать трансформации этих клеток. Эти молекулярные изменения также внесены в схему классификации. Поскольку классификация ВОЗ основывается в большей степени на природе клеток, чем на клинических проявлениях, лейкозы и лимфомы не различают, если они представлены одинаковыми типами опухолевых клеток. Классификация ВОЗ имеет большое практическое значение, поскольку терапия лейкозов и лимфом часто одна и та же.
В-клеточные новообразования

Лимфобластный лейкоз/лимфома из В-клеток-предшественников

В-клеточный острый лимфобластный лейкоз/лимфома (В-ОЛЛ) затрагивает про- и пре-В-клетки или все незрелые стадии развития В-клеток, что демонстрируется экспрессией поверхностных CD-маркеров и стадией реаранжировки гена lg в каждом индивидуальном случае лейкоза (рис. 17.9). Опухолевые клетки могут экспрессировать маркеры бластов или маркер стволовых клеток CD34 (особенно про-В-клетки), а также «ранние» маркеры В-лимфоцитов: CD10 и CD19. Так же как и нормальные про-В- или пре-пре-В- и пре-В-клетки, соответствующие клетки ОЛЛ экспрессируют терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT) в ядрах.

Рис. 17.9. Соотношение стадий развития В-клеток с В-клеточными злокачественными опухолями

Экспрессия этого фермента, в норме необходимого для реаранжировки генов lg, отражает тот факт, что эти клетки В-ОЛЛ находятся в процессе генной реаранжировки. Это значит, что они еще не экспрессируют полную молекулу lg на своей поверхности и имеют только цитоплазматические μ-цепи, что соответствует стадии пре-В-клеток. При лечении детей с этим типом лейкоза наиболее эффективна химиотерапия.

Существует также вариант агрессивного незрелого В-ОЛЛ, который является лейкозным двойником лимфомы Беркитта, при котором имеются сходные характеристики транслокации генов. Эти клетки похожи на незрелые В-клетки, только что вышедшие на периферию из костного мозга. Они экспрессируют CD20, обладают «выключенной» TdT, их ген lg полностью реаранжирован, а на клеточной поверхности находятся IgM.

Лимфома/лейкоз Беркитта

Лимфома Беркитта может проявляться и как лейкоз, и как лимфома. Она характеризуется транслокацией онкогена с-тус в локус гена Н-цепи lg или одного из двух генов L-цепей - t(8; 14), t(8; 22) или t(2; 8) (рис. 17.10). Белок с-тус в норме вовлекается в активацию генов для клеточной пролиферации, когда покоящаяся клетка получает сигнал к делению. Транслокация в гены lg приводит к увеличению экспрессии с-тус и активации клеточной пролиферации. Возможно, антигенная стимуляция В-клеток инициирует повышение экспрессии с-тус под контролем гена lg.

Рис. 17.10. Некоторые В-клеточные новообразования, связанные с транслокацией генов в хромосомный локус, кодирующий ген Н-цепи Ig на хромосоме 14

В экваториальной Африке эта лимфома является эндемичной и связана с инфицированием В-клеток вирусом Эпштейна-Барр Лимфома Беркитта - это одна из опухолей, часто развивающихся у пациентов с иммуносупрессией (при СПИДе и медикаментозной иммуносупрессии). В клетках лимфомы Беркитта иногда обнаруживается геном вируса Эпштейна - Барр.

Фолликулярная лимфома

Фолликулярная лимфома представляет собой трансформированные В-клетки, в норме обнаруживаемые в фолликулах лимфатических узлов (рис. 17.11). В-клетки стимулируются антигеном в фолликуле, образуя зародышевый центр. Они могут отвечать на эту стимуляцию пролиферацией, переключением изотипов иммуноглобулинов и дифференцировкой в плазматические клетки. Если их антитела плохо соответствуют этому антигену или имеют к нему низкую аффинность, то клетки подвергаются апоптозу, или программируемой клеточной гибели. При фолликулярных лимфомах ген bcl-2, который продуцирует белок, препятствующий апоптозу, транслоцируется в ген Н-цепи Ig t(14;18) (см. рис. 17.10).

Рис. 17.11. Срез нормального лимфатического узла с указанием участков, вовлекаемых в Т- и В-клеточные лимфомы; ХЛЛ/ЛМЛ, лимфома из клеток мантийной зоны и фоликуллярная лимфома происходят из В-клеток

Это приводит к продолжительной экспрессии белка bcl-2, предотвращающего гибель клеток. Фактически, такие В-клеточные новообразования имеют только низкий уровень пролиферации, заболевание отличается длительным хроническим течением. Их фенотип (поверхностные CD-маркеры) соответствует фенотипу у нормальных В-клеток фолликулярного центра: CD19+, CD20+, CD10+ и поверхностные иммуноглобулины.

Лимфома из клеток мантийной зоны

В норме зародышевый центр окружен венцом малых покоящихся В-клеток, которые не ответили на антиген (см. рис. 17.11). Новообразования этих клеток мантийной зоны обладают таким же В-клеточным фенотипом, как и их нормальные двойники, CD19+, CD20+. CD5+, slgM. При многих лимфомах из мантийных клеток происходит транслокация гена bcl-1 в область гена Н-цепи Ig - t(ll; 14), приводящая к избыточной экспрессии белка циклина D1 (см. рис. 17.10). Циклин D1 в норме отвечает за стимуляцию прогрессии клеточного цикла от фазы G1 к фазе S, приводящей к делению клетки. Эта лимфома обладает более высокой пролиферативной активностью и более агрессивным течением, чем фолликулярная.

Лимфома из клеток краевой зоны

Лимфомы из клеток краевой зоны наиболее часто встречаются в лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистой оболочкой (MALT) , и, что интересно, могут быть связаны с хронической антигенной стимуляцией или аутоиммунным заболеванием этого органа. Например, хроническая инфекция Helicobacter pilory желудка может привести к развитию лимфомы желудка, которую, таким образом, можно предотвратить терапией антибиотиками. Сходным образом у пациентов с аутоиммунным тиреоидитом (тupeoидит Хашимото) и аутоиммунным заболеванием слюнных желез (синдром Шегрена) существует высокий риск развития В-клеточной лимфомы в пораженном органе.

Взаимосвязь между этими аутоиммунными заболеваниями или инфекцией и лимфомой позволяет предложить две интересные и не противоречащие друг другу гипотезы. Во-первых, хроническая антигенная стимуляция обеспечивает благоприятную почву для развития В-клеточной лимфомы. В-клетки, в которых гены иммуноглобулинов продолжают подвергаться соматическим мутациям, могут накапливать трансформирующие мутации при продолжительной стимуляции. Во-вторых, дефект в регуляции В-лимфоцитов ввиду то ли внутренних причин, то ли недостаточного подавления их активности Т-лимфоцитами приводит как к аутоиммунному заболеванию, так и, возможно, к лимфоме.

Опухолевые клетки иммунной системы мигрируют по тем же путям, что и их нормальные двойники. Лимфома краевой зоны долгое время остается локализованной, а затем повторяет движение нормальных клеток MALT, перемещаясь в другие участки MALT.

Хронический лимфоцитарный лейкоз/лимфома из малых лимфоцитов

Считается, что хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ) / лимфома из малых лимфоцитов (ЛМЛ) является опухолевым перерождением субпопуляции В-лимфоцитов, известных как В-1-клетки. У некоторых пациентов ее первым клиническим проявлением является лейкоз (с первичным вовлечением крови и костного мозга), тогда как у других больных сначала вовлекаются лимфатические узлы (см. рис. 17.11). Так же как и нормальные В-1-клетки, клетки ХЛЛ/ЛМЛ экспрессируют маркеры зрелых В-клеток CD19 и CD20, а также CD5 и поверхностный IgM.

Хронический В-клеточный лейкоз - это наиболее распространенный лейкоз в Северной Америке и Западной Европе. Особенно часто он встречается у людей старших возрастных групп. Такие больные крайне чувствительны к инфекции, что наводит на мысль о том, что их неопухолевые клетки функционируют недостаточно хорошо. Характерно наличие аутоантител, особенно против эритроцитов, приводящих к развитию гемолитической анемии.

Антитела могут синтезироваться опухолевым клоном или, что бывает чаще, неизмененными В-клетками. Взаимосвязь этих аутоиммунных состояний с лейкозом/лимфомой снова наводит на мысль о том, что лимфоидное новообразование возникает на месте нарушения иммунной регуляции или по причине ее возникновения. Заболевание характеризуется долгим клиническим течением, но возможно и массивное поражение каждого органа, периферической крови и костного мозга опухолевыми клетками.

Диффузная крупноклеточная лимфома из В-клеток

Диффузная крупноклеточная лимфома из В-клеток - это гетерогенная группа лимфом, которые могут возникать de novo на единственном участке и быть формой прогрессии одной из перечисленных медленно растущих лимфом (например, фолликулярной) или следствием плохо контролируемой инфекции вирусом Эпштейна-Барр в организме больных, получающих иммуносупрессивные препараты (например, у ВИЧ-позитивных лиц, больных после трансплантации органов или у пациентов с иммунодефицитом). Во всех случаях клетки экспрессируют В-клеточные маркеры CD19 и CD20 и часто - поверхностный Ig. Одна подгруппа имеет транслокацию bcl-6 - протоонкогена, который в норме действует как супрессор транскрипции некоторых генов, необходимых для нормального развития В-лимфоцитов и зародышевых центров.

Поведение возникших de novo диффузных крупноклеточных В-клеточных лимфом непредсказуемо. Благодаря современному микроанализу кДНК для этих разновидностей опухолей лимфомы разделили на две крупные группы. Это разделение связано с различиями в образцах генной экспрессии (продукция иРНК), причем выявлена корреляция между этими молекулярными образцами и поведением опухоли. Такая молекулярная характеристика должна привести к лучшему пониманию биологии лимфом и разработке практических рекомендаций к лечению.

Взаимосвязь инфекции вирусом Эпштейна-Барр с диффузными крупноклеточными лимфомами из В-клеток и лимфомой Беркитта у пациентов с иммуносуппрессией наглядно показывает, каковы последствия нарушения саморегуляции иммунной системы. Инфекция В-клеток вирусом Эпштейна - Барр (через рецептор вируса CD21) приводит к поликлональной пролиферации В-лимфоцитов. У здоровых индивидуумов В-клетки, инфицированные вирусом Эпштейна-Барр, удаляются из организма цитотоксическими Т-лимфоцитами.

Если Т-клеточный контроль оказывается недостаточным, инфицированные В-лимфоциты продолжают экспансивный рост, и в некоторых из них могут произойти дополнительные мутации, такие как транслокация гена с-тус, что вызовет злокачественную трансформацию клеток и последующий независимый рост. Например, вирус Эпштейна-Барр можно использовать для продления жизни В-клеток в тканевой культуре, в которой В-клетки не являются объектом, контролируемым Т-лимфоцитами. Это также важно в клинической практике: у пациентов, получающих иммуносупрессивную терапию, существует точка, в которой пока еще возможно предотвратить развитие В-клеточной лимфомы, прекратив терапию и разрешив иммунной системе организма сдерживать патологическую В-клеточную пролиферацию. Конечно, это невозможно у больных СПИД.

Опухоли плазматических клеток

Опухолевый рост плазматических клеток может происходить на ограниченном участке (изолированно), приводя к плазмоцитоме или на многих, преимущественно в костях, и тогда он называется множественной или плазмоклеточной миеломой. Как и для нормальных плазматических клеток, фактором роста для миеломных клеток является IL-6.

Опухолевые плазматические клетки могут продолжать синтезировать и секретировать свои продукты - белки, составляющие иммуноглобулины В большинстве случаев эти секретируемые моноклональные белки вызывают у пациента больше проблем, чем сами перерожденные клетки. Депозиты легких цепей, названные амилоидом, могут вызывать недостаточность разных органов, особенно почек. Выделение из мочи некоторых больных множественной миеломой свободных легких цепей иммуноглобулина - белка Бенс-Джонса - позволяет понять их структуру. Эти белки являются моноклональными; они определяются в сыворотке и иногда в моче в виде М-пика в у-области на электро-фореграмме.

Пик выше пограничной полосы формируется вследствие того, что все иммуноглобулины идентичны по размеру и заряду и мигрируют в одно и то же место. В большинстве случаев продуцируются моноклональные IgG; IgA являются следующим наиболее часто обнаруживаемым изотипом иммуноглобулина. Уровни других нормальных Ig у этих пациентов значительно снижаются, что делает их иммуносупрессивными по продукции антител и, таким образом, восприимчивыми к инфекции. До появления развернутой клинической картины миеломы у больных может появляться небольшое количество моноклональных Ig в течение многих лет. Многие пациенты остаются на этой стадии, и заболевание у них не прогрессирует. Маленькие М-пики могут быть обнаружены в ассоциации с другими лимфоидными новообразованиями, такими как ХЛЛ, и даже при неопухолевых состояниях.

Лимфоплазмоцитарная лимфома (макроглобулинемия Вальденстрема)

Лимфоплазмацитарная лимфома/макроглобулинемия Вальденстрема - это новообразование единственного клона В-клеток. При микроскопии оно выглядит как смесь лимфоцитов, плазматических клеток и чего-то промежуточного - лимфоплазмоцитоидных клеток. Опухолевые клетки находятся в лимфатических узлах, костном мозге и селезенке. Хотя эти лимфомы встречаются нечасто, они представляют интерес для иммунологов вследствие гиперпродукции IgM. Крупный размер и высокая концентрация IgM в крови может сочетаться с медленным кровотоком и «засорением» сосудов их агломератами (синдром повышенной вязкости крови). У некоторых пациентов IgM имеют патологическую структуру, вследствие чего при охлаждении они выпадают в осадок (с образованием криоглобулинов) и вызывают расстройства микроциркуляции в конечностях больных (пальцы рук и ног).

Т-клеточные новообразования

Острый лимфобластный лейкоз/лимфома из Т-клеток-предшественников

Острый лимфобластный лейкоз из клеток-предшественников Т-лимфоцитов (Т-ОЛЛ) - это новообразование из незрелых Т-клеток с характеристиками незрелых тимоцитов, остановившихся в своем развитии. Как показано на рис. 17.12, клетки Т-ОЛЛ экспрессируют все Т-клеточные маркеры (CD2, CD5 и CD7), которые появляются на ранних стадиях развития Т-клеток. Некоторые Т-ОЛЛ обладают характеристиками незрелых клеток тимуса и не экспрессируют CD4 или CD8 (т.е. они дважды негативные).

Рис. 17.12. Соотношение стадий развития Т-клеток и злокачественных новообразований из них

Большинство нормальных тимоцитов и клеток Т-ОЛЛ являются более зрелыми, экспрессируя оба маркера: и CD4, и CD8 (дважды позитивные); при этом CD3 на своей поверхности они экспрессируют в небольшом количестве или совсем не экспрессируют (их обозначают как общие тимоциты). В этих клетках еще не завершена реаранжировка генов их Т-клеточного рецептора (TCR) и все еще экспрессируется TdT. Острый лимфобластный лейкоз проявляется в виде лейкоза или тяжелого процесса в тимусе. Лечение не столь успешно, как при В-ОЛЛ.

Новообразования из периферических Т-клеток

Клинические проявления лимфом из периферических Т-клеток разнообразны. Они обнаруживаются там, куда обычно мигрируют Т-клетки, а именно в коже, легких, стенках сосудов, ЖКТ и лимфатических узлах. Они также сохраняют некоторые функции нормальных зрелых Т-клеток. Вследствие этого продукция цитокинов злокачественными клетками приводит к скоплению воспалительных клеток, в том числе эозинофилов, плазмоцитов и макрофагов. Часто лимфы из периферических Т-клеток более агрессивны, чем из В-клеток. Две болезни из этой группы рассмотрим подробнее.

Кожная Т-клеточная лимфома

Если опухоль ограничена пределами кожи, Т-клеточную кожную лимфому часто называют ее исторически сложившимся названием «грибовидный микоз», поскольку раньше считалось, что пациенты страдают от хронической грибковой инфекции, при которой отмечаются восковое перерождение и истончение кожи в течение многих лет. Сейчас понятно, что это кожное заболевание обусловлено инфильтрацией эпидермиса злокачественными СD4+-Т-клетками. В дальнейшем клетки могут распространяться в лимфатические узлы и даже в кровь. Злокачественные Т-клетки, обнаруживаемые в кровотоке, называются клетками Сезари; соответственно, у больного развивается синдром Сезари.

Т-клеточная лимфома/лейкоз взрослых

Т-клеточная лимфома/лейкоз взрослых (ТЛЛВ) представляет собой агрессивное Т-клеточное новообразование. Его описали в 1970-е гг. в одной из областей Японии, где оно являлось эндемичным. Также его обнаружили у обитателей Карибских островов, в некоторых частях центральной Африки и в небольшой области на юго-востоке США. Обычно ТЛЛВ является новообразованием из зрелых СD4+-Т-клеток. Для таких клеток аутокринным фактором роста является IL-2. При ранних попытках терапии показано, что это новообразование временно (несколько месяцев) отвечает на введение антител (названных как анти-Тас); как было выявлено позже, они являются специфичными для ос-цепи рецептора к IL-2 (CD25).

Заболевание вызывается человеческим Т-клеточным лимфотропным вирусом I типа из семейства ретровирусов (human Т cell lymphotropic virus 1 - HTLV-1), который был описан и выделен еще до открытия СПИДа и ВИЧ. Геномная структура провируса похожа на ВИЧ; она тоже содержит регион LTR и кодирует структурные и регуляторные белки, а также вирусные ферменты (обратную транскриптазу, интегразу и протеазу).

Вирусный белок Tax, который трансактивирует транскрипцию HTLV-1 путем связывания с областью LTR, активирует также и клеточные гены, в том числе те, которые кодируют IL-2, α-цепь IL-2R и гормон, подобный паратиреоидному (в обычных условиях не экспрессируется Т-клетками). Поэтому активация провирусной транскрипции связана с активацией и пролиферацией Т-клеток. У пациентов с ТЛЛВ часто отмечают значительно повышенную концентрацию кальция, что является результатом усиленного синтеза паратиреоидподобного гормона

Пути передачи HTLV-1 похожи на пути передачи ВИЧ в том смысле, что он передается через кровь и жидкости тела; наиболее эффективен путь передачи через грудное молоко. Поэтому многие пациенты инфицируются HTLV-1 в младенческом возрасте. Инкубационный период у этого вируса длительный, обычно 20 - 40 лет. В основном вирус инфицирует СD4+-Т-клетки, а также поражает нервную систему. У некоторых пациентов заболевание имеет клинические черты неврологического процесса.

Предметом продолжительной дискуссии является происхождение клеток Рид - Штернберга, поскольку они не экспрессируют маркеров никаких клеточных линий и характеризуются экспрессией только CD15 и CD30. В последних исследованиях с использованием молекулярных технологий была показана возможность реаранжировки генов lg, что подтверждает их происхождение из В-клеточной линии. Открытие гипермутации в генах иммуноглобулинов свидетельствует, что клетки Рид - Штернберга образовались из В-клеток, уже прошедших зародышевый центр. Хотя злокачественные клетки и были идентифицированы как В-клетки, по течению эти лимфомы отличаются от крупноклеточных В-клеточных лимфом, что и является причиной того, что их продолжают классифицировать как самостоятельную нозологию. Лимфомы, таким образом, подразделяют на лимфомы Ходжкина и неходжкинские.

Иммунотерапия

Увеличившиеся знания по биологии лимфом в сочетании с техническими возможностями производства моноклональных антител и белков привели к разработке нового поколения терапевтических средств. В настоящее время химерные и гуманизированные антитела, направленные, в частности, против CD20, широко используются в лечении В-клеточных лимфом. Если применяют только одни антитела («холодное» использование), они могут вызывать уничтожение опухолевых клеток путем их опсонизации при покрытии антителами, а в случае использования конъюгатов этих антител за непосредственное уничтожение клетки отвечают токсины.

Кроме современной химиотерапии дополнительно используют вещества, блокирующие цитокины или цитокиновые рецепторы, необходимые для пролиферации злокачественных клеток. Традиционные средства химиотерапии, которые в основном являются неспецифическими веществами, уничтожают все делящиеся клетки. Технологии, использованные при разработке этих новых специфичных препаратов, также широко применяются при разработке средств для лечения аутоиммунных заболеваний и нелимфоидных онкологических заболеваний, таких как рак молочной железы.

Иммунная система в норме работает как тщательно отрегулированная сеть, отвечающая на патогенные факторы извне, но не причиняющая никакого вреда самой себе. Причем после того как угроза миновала, иммунная система возвращается в более спокойное состояние, но уже обладая памятью о произошедших событиях. Истощение , хроническая стимуляция или возможность неконтролируемого роста одного из компонентов нарушают работу оставшихся элементов. Таким образом, поскольку регулирование в сети нарушено, развитие каждого из трех главных категорий расстройств: иммунодефицита, аутоиммунного заболевания или лимфоидного новообразования, делает возможным развитие еще одного или даже двух типов заболеваний.

Выводы

1. Иммунодефицитные расстройства называются первичными, если причиной заболевания является дефицит, и вторичными, если недостаточность развивается вследствие других заболеваний или в результате лечения.

2. Иммунодефицитные заболевания могут развиваться в результате нарушений развития или функционирования В-клеток, Т-клеток, фагоцитирующих клеток или компонентов комплемента.

3. Иммунодефицитные расстройства вызывают у пациентов предрасположенность к рецидивирующим инфекциям. Тип развивающейся инфекции обычно зависит от того, какое именно звено иммунной системы нарушено. Дефекты гуморального звена иммунитета приводят к повышенной восприимчивости к бактериальным инфекциям; дефекты в клеточно-опосредованном иммунитете - к вирусным и грибковым инфекциям; дефекты фагоцитирующих клеток - к инфекциям пиогенными микроорганизмами, а дефекты в системе комплемента - к бактериальным инфекциям и аутоиммунным расстройствам.

4. Иммунодефициты проявляются одним типом дефектов или расстройств иммунной системы. Другими типами иммунологических расстройств являются нерегулируемая пролиферация В- или Т-лимфоцитов, избыточное образование продуктов лимфоцитарных или фагоцитирующих клеток и нерегулируемая активация компонентов комплемента. Это может приводить к ассоциациям иммунодефицитов с аутоиммунными заболеваниями или злокачественными новообразованиями.

5. Инфицируя и уничтожая СD4+-лимфоциты, ВИЧ вызывает выраженное иммуносупрессивное заболевание, известное как СПИД.

6. Лимфоидные новоообразования иммунной системы развиваются в результате неконтролируемой моноклональной пролиферации, которую можно соотнести с развитием нормальных клеток на определенной стадии дифференцировки. При многих злокачественных лимфоидных новообразованиях обнаруживают специфические хромосомные транслокации, вызывающие нарушения регуляции процессов клеточной пролиферации или смерть. Некоторые из них связаны с инфекциями вирусами, такими как вирус Эпштейна-Барр и HTLV-1, выступающими или как стимуляторы клеточного роста, или как онкогенные вирусы.

Р.Койко, Д.Саншайн, Э.Бенджамини

Прохождение иммунокомпетентными клетками антигензависимых и антигеннезависимых стадий развития происходит в разных органах. Уже это обстоятельство указывает на разницу условий, нужных для прохождения этих стадий. Такие условия далеко не исчерпываются действием антигенов.

Они в значительной степени являются результатом взаимодействия между субпопуляциями самих лимфоидных клеток, а также лимфоцитов с нелимфоидными клетками кроветворных органов - макрофагами и стромальными механоцитами.

Лимфоидные клетки и их клетки-предшественники обеспечиваются в органах лимфопоэза нужным для пролиферации, дифференцировки и для распознавания антигенов микроокружением. Микроокружение отличает не только один лимфоидный орган от другого, но и отдельные участки внутри каждого органа. Оно определяет возможность заселения данной территории либо Т-, либо В-клетками, возможность развития на ней либо антителопродуцирующих клеток, либо иммунных лимфоцитов и, наконец, способствует распознаванию антигенов иммунокомпетентными клетками.

Микроокружение , насколько сейчас известно, создают клетки, лишенные иммунологической компетентности. Их воздействие на антигензависимые стадии развития лимфоидных клеток может, поэтому, носить поликлональный характер, т. е. распространяться не только на тс клетки, рецепторы которых комплементарны к присутствующим в данный момент в лимфоидной ткани антигенам. Тем не менее факторы микроокружения не препятствуют, а, наоборот, обеспечивают возможность преимущественного развития тех лимфоидных клеток, от которых зависит специфичность иммунологических реакций на данный антиген.

С функциональной и гистогенетической точки зрения клетки лимфоидной системы могут быть разделены на три отдела (компартмента):
1) стволовые кроветворные клетки костного мозга;
2) клетки-предшественники первичных лимфоэпителиальных органов, зачатки которых закладываются в местах стыковки кишечного эпителия с эктодермальным эпителием жаберных карманов (тимус) или клоаки (фабрициева сумка);
3) лимфоидные клетки вторичных лимфоидных органов (лимфоузлов и селезенки), зачатки которых имеют мезодермальное происхождение (Miller, 1974). Первичные и вторичные лимфоидные органы, хотя и образуют систему, объединенную интенсивными клеточными миграциями, имеют ряд существенных различий. В частности, митотическая активность лимфоидных клеток на территории первичных лимфоидных органов антигеннезависима, а во вторичных лимфоидных органах она стимулируется антигенами.

Гистогенез плазматических клеток и формирование центров размножения имеет место только во вторичных, но не в первичных лимфоидных органах. Первичные лимфоидные органы ноиулируются только стволовыми клетками или их иммунологически некоммитированными потомками (Вернет, 1971); вторичные лимфоидные органы популируются коммитированными иммунокомпетентными клетками: Т-клетками (потомки тимоцитов) и В-клетками (потомки клеток фабрициевой сумки у птиц и ее аналогов у млекопитающих).

Основным местом образования лимфоцитов служит кроветворная ткань селезенки и лимфатических узлов. В костном мозге и периферической крови в норме встречаются только зрелые лимфоциты. При патологии в костном мозге и периферической крови могут появляться незрелые и атипические формы клеток лимфоидного ростка.

Клетки лимфоидного ростка

К клеткам лимфоидного ростка относятся:

Лимфобласт

Лимфобласт - клетка лимфоидного ряда размером 12 - 18 мкм. Ядро круглое или слегка овальное, распределение хроматина в нем неравномерное, рыхлое. В ядре чаще содержится 1, реже 2 - 3 ядрышка голубого цвета. Цитоплазма базофильная, с отчетливо выраженной перинуклеарной зоной.

Лимфобласты (фотографии)

Пролимфоцит

Пролимфоцит - клетка несколько меньшего размера, чем лимфобласт (12 - 15 мкм). Структура ядра грубая, отчетливо видны 1 - 2 нуклеолы светло-фиолетового цвета. Цитоплазма не отличается от таковой лимфобласта.

В норме лимфобласты и пролимфоциты встречаются в селезенке и лимфоузлах, в костном мозге и периферической крови они появляются только при патологии.

Пролимфоциты (фотографии)

Лимфоцит

Лимфоцит - зрелая клетка лимфоидного ряда, размером чаще 7 - 10 мкм. Ядро круглое, овальное, иногда бобовидное. Структура ядра грубая, чаще состоит из грубых комков базихроматина и оксихроматина, создавая впечатление глыбчатости. Ядро окрашивается в темно- или светло-фиолетовый цвет, в нем иногда обнаруживаются небольшие светлые участки, имитирующие ядрышки. Цитоплазма лимфоцита светло-синяя с просветлением вокруг ядра. Часть лимфоцитов имеет в цитоплазме азурофильную зернистость, окрашивающуюся в красный цвет. Ободок цитоплазмы может иметь различные размеры, в связи с чем, лимфоциты делят на три группы: узкоцитоплазменные, среднецитоплазменные и широкоцитоплазменные. В литературе широкоцитоплазменные лимфоциты часто называют "большими", диаметр их составляет 9 - 15 мкм, цитоплазма занимает значительную часть клетки, светло-голубая, часто с крупными азурофильными гранулами. Хроматин ядра грубый, но не такой плотный как у остальных лимфоцитов. Среднецитоплазменные и узкоцитоплазменные лимфоциты часто называют "малыми", они составляют большую часть лимфоцитов периферической крови. Их диаметр 6 - 9 мкм, ядро круглое или слегка овальное, темноокрашенное, с плотным хроматином, занимает большую часть клетки. Цитоплазма видна как узкий ободок или "серп" вокруг ядра.

Малые лимфоциты (фотографии)

Большие лимфоциты (фотографии)

Атипичные лимфоциты

При различных патологических процессах могут обнаруживаться атипичные формы лимфоцитов :

1. клетки небольших размеров с пикнотическим ядром и еле заметной цитоплазмой;
2. клетки Ридера , имеющие почкообразную зазубренную форму ядер или двудольчатые формы ядер;
3. клетки с вакуолизацией в цитоплазме , реже - в ядре;
4. голые лимфоцитарные ядра ;
5. клетки лейколиза - разрушенные в процессе приготовления препарата лимфоциты. В большом количестве встречаются при хроническом лимфолейкозе (клетки Боткина-Гумпрехта);
6. атипичные мононуклеары - большие клетки с обильной базофильной цитоплазмой. Часто темная базофильная периферическая цитоплазма отделяется тонкой линейной границей от более бледной околоядерной зоны. Ядра большие, могут содержать ядрышки и иногда имеют вдавления. Они очень похожи на ядра моноцитов. Такие клетки встречаются преимущественно при инфекционном мононуклеозе, но могут встречаться и при других вирусных инфекциях;
7. плазматизированные лимфоциты - широкоплазменные лимфоциты с интенсивно синей цитоплазмой и тяжистым ядром. Встречаются при вирусных инфекциях.

Клетки лейколиза (фотографии)

Атипичные мононуклеары (фотографии):

Плазматизированные лимфоциты (фотографии):

Плазмобласт, проплазмоцит и плазмоцит

К клеткам лимфоидного ростка относятся также плазмобласт, проплазмоцит и плазмоцит.

Плазмобласт - клетка размером 16 - 20 мкм. Ядро нежной структуры, занимает большую часть клетки, располагаясь центрально или несколько эксцентрично. Нуклеолы (1 - 2) не всегда четко видимы. Цитоплазма интенсивно синего цвета; характерна перинуклеарная зона просветления.

Проплазмоцит - переходная форма от плазмобласта к зрелому плазмоциту. Размер клетки несколько больше, чем у зрелого плазмоцита (иногда до 20 мкм). Ядро занимает большую часть клетки и часто расположено эксцентрично, в нем могут быть видны остатки нуклеол. Цитоплазма резко базофильна с просветлением вокруг ядра, иногда синий цвет выражен меньше.

Плазмоциты - зрелые плазматические клетки. Весьма разнообразны по форме и величине (размер от 8 до 20 мкм). Ядро круглой или овальной формы, имеет грубую колесовидную исчерченность и расположено эксцентрично. Цитоплазма окрашена в интенсивно синий цвет с ясно выраженной перинуклеарной зоной просветления; может содержать различные вакуоли, что придает ей ячеистое строение. Плазматические клетки больших размеров могут иметь цитоплазму, окрашенную в серо-голубой цвет с менее отчетливой перинуклеарной зоной или с отсутствием ее. Иногда встречаются двух- и трехъядерные формы.

Плазматические клетки (микрофотографии):

В норме единичные плазмобласты, проплазмоциты и плазматические клетки встречаются в пунктате лимфоузлов и селезенки, в костном мозге встречаются единичные плазмоциты. В периферической крови плазматические клетки встречаются только при патологии: при ряде инфекций (корь, краснуха, ветряная оспа), сывороточной болезни, некоторых болезнях кожи, инфекционном мононуклеозе, агранулоцитозе, туберкулезе, лимфогранулематозе, тяжелом сепсисе, крупозной пневмонии, актиномикозе, циррозе печени, миеломной болезни.

Плазматические клетки при миеломной болезни обычно называют миеломными, так как они могут иметь характерные черты. Миеломные клетки имеют часто большие размеры, достигающие иногда 40 мкм и более в диаметре. Ядро нежное, содержит 1 - 2 больших или несколько мелких ядрышек, окрашенных в голубой цвет. Нередко встречаются клетки с 3 - 5 ядрами. Цитоплазма больших размеров, окрашивается в различные цвета: светло-голубой, светло-фиолетовый, интенсивно-фиолетовый, а иногда красноватый, обусловленный присутствием гликопротеидов. Околоядерное просветление выражено нечетко или отсутствует. Иногда в цитоплазме находят гиалиновые включения - тельца Русселя величиной 2 - 4 мкм, количество которых варьирует.

Литература:

• Л. В. Козловская, А. Ю. Николаев. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования. Москва, Медицина, 1985 г.
• Руководство по клинической лабораторной диагностике. (Части 1 - 2) Под ред. проф. М. А. Базарновой, академика АМН СССР А. И. Воробьева. Киев, "Вища школа", 1991 г.
• Руководство к практическим занятиям по клинической лабораторной диагностике. Под ред. проф. М. А. Базарновой, проф. В. Т. Морозовой. Киев, "Вища школа", 1988 г.
• Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. Е. А. Кост. Москва "Медицина" 1975 г.
• Исследование системы крови в клинической практике. Под ред. Г. И. Козинца и В. А. Макарова. - Москва: Триада-Х, 1997 г.